Pierwsze piętro renesansowego pałacu wawelskiego pełniło funkcje prywatne – mieściły się tu apartamenty królewskie, pokoje gościnne i pomieszczenia dworu. Do dziś zachowały się m.in. XVI-wieczne belkowo-kasetonowe stropy, polichromowane fryzy oraz gotycko-renesansowe portale z warsztatu mistrza Benedykta. Zwiedzający mogą zobaczyć m.in. jadalnię z włoskimi meblami i obrazami z daru Karoliny Lanckorońskiej, sypialnię królewską z późnorenesansowym łożem z baldachimem, czy garderobę z dekoracyjnym fryzem medalionowym. Wnętrza zdobią także arrasy z kolekcji Zygmunta Augusta, wykonane w brukselskich warsztatach z jedwabiu, wełny i złotych nici. Szczególne znaczenie mają też pomieszczenia o bogatej historii: Sień Poselska prowadząca na piętra, Kurza Stopka – wieża-belweder z herbami Wazów, Sala Kolumnowa w duchu klasycystycznym czy sypialnia prezydenta Ignacego Mościckiego, urządzona w latach 30. XX wieku w stylu art déco. Całość ukazuje wielowarstwową historię królewskiej rezydencji – od renesansu po czasy najnowsze.